OSのライセンス認証は、サーバーインスタンスを作った初回に一度認証すれば良いですか？

サーバーインスタンス上でWindowsOS等の有料のオフィシャルイメージテンプレートをご利用いただく場合のライセンス認証は、初回のみならず、定期的に実施されます。
ライセンス認証を行うための共通機能ゲートウェイとの接続構成は維持してください。